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纤维蛋白原与凝血酶
源叶生物 / 2020-11-02

 一、纤维蛋白原

    纤维蛋白原(FibrinogenFg),即凝血因子Ⅰ,其分子量约340KD,由α、β、γ三对不同多肽链所组成,多肽链间以二硫键相连。α-链分子量63.5 kDa β-链分子量56 kDa γ链分子量47 kDa (约含4% 碳水化合物)。在凝血酶作用下,α链与β链分别释放出A肽与B肽,生成纤维蛋白单体。在此过程中,由于释放了酸性多肽,负电性降低,单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。但此时单体之间借氢键与疏水键相连,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca2+与活化的ⅩⅢ因子作用下,单体之间以共价键相连,则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块,完成凝血过程。

源叶产品牛血纤维蛋白原(货号:S12024

 

 

 

纤维蛋白原溶液在50℃以上变性,因此加热温度不宜超过50℃;另外,纤维蛋白原一般应采用37℃的生理盐水溶解,溶解时温度不宜过低,在4℃条件下以及不含盐的溶液中难以溶解。

 

 

 

 

 

 

二、凝血酶

凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量37KD,是由两条肽链(31KD6KD)通过二硫键组成的。凝血酶是凝血酶原(凝血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白质水解酶,其催化纤维蛋白原(fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。

源叶产品凝血酶(货号:S10117

 

 

 

产品特点:

1、纯度高:SDS-PAGE检测图谱无明显杂蛋白条带;

2、比活高:比活力大于2000单位/mgpr

3、不含有其他蛋白酶活性;

 

 

三、牛血纤维蛋白原检测凝血酶效价

纤维蛋白原溶液的制备  取纤维蛋白原,用0.9%氯化钠溶液制成含0.1%凝固物的溶液。

标准凝血酶溶液的制备  取凝血酶标准品,用0.9%氯化钠溶液溶解分别定量稀释制成每1ml中含5.0单位、6.4单位、8.0单位、10.0单位的标准品溶液。

供试品溶液的制备  取本品5瓶,分别用0.9%氯化钠溶液溶解并定量转移至同一量瓶中,混匀,稀释至刻度,再用0.9%氯化钠溶液定量稀释成与标准溶液相同的浓度。

测定法 取内径1cm、长10cm的试管4支,各精密加入纤维蛋白原溶液0.9ml,置37℃±0.5℃水浴中保温5分钟,再分别精密量取上述4种浓度的标准品溶液各0.1ml,迅速加入上述各试管中,立即记时、摇匀,置37℃±0.5℃水浴中,观察纤维蛋白的初凝时间,每种浓度测5次,求平均值(5次测定之最大值与最小值的差不得超过平均值的10%,否则重测)。标准品溶液的浓度应控制凝结时间在14秒~60秒为宜。以标准品效价(单位)的对数为横坐标,凝结时间(秒)的对数为纵坐标,进行直线回归(r≥0.99)。精密吸取供试品溶液0.1ml,按上述方法平行测定5次,求出凝结时间的平均值(误差要求同标准曲线),用线性回归方程求得单位数,计算,即得。

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