产品介绍
细胞
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BrdU浓度(μM)
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孵育时间(min)
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A549
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40
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40
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Hela
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40
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40
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NRK-52e
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40
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40
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SKOV3
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80
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120
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H9C2
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40
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40
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动物实验:采用生理盐水溶解BrdU粉末,配制成10 mg/mL浓度,过滤除菌后备用。一般按照50 mg/kg的剂量,腹腔注射给药,共4次,每次间隔2小时,最后一次注射24小时后,处死动物。
细胞实验:对于细胞,BrdU的使用浓度和处理时间与细胞种类有关。一般来说,处理肿瘤细胞所需浓度和时间都较低,成纤维细胞或上皮细胞等增殖较慢的细胞需要提高浓度并延长作用时间,建议浓度范围为20-100 μM,作用时间为40 min-4 h,可根据具体细胞的种类进行摸索调整。上表为经测试过的常用细胞处理浓度及时间,仅供参考。
Brdu说明:DNA病毒的抑制剂。在免疫组化中的应用:BrdU标记细胞免疫组化染色(SP法),BrdU(溴化脱氧尿嘧啶核苷)可以在体内和体外掺入到处于S期的细胞所合成的DNA链中,以标记DNA。
Brdu溶解:在1M的氢氧化铵中的溶解度为50mg/ml;也可以溶于DMF、DMSO,溶解度在50-100 mg/mL。0.16 - 500 mg/mL的Brdu可以抑制胚胎肾细胞细胞的生长,1.0 mg/mL有较强的抑制作用。
Brdu应用:在免疫组化中的应用:BrdU标记细胞免疫组化染色(SP法),BrdU(溴化脱氧尿嘧啶核苷)可以在体内和体外掺入到处于S期的细胞所合成的DNA链中,以标记DNA。通过流式检测BrdU的掺入量可以从单个细胞水平评价DNA合成细胞频率。用于在单细胞水平检测功能性激活,即同时检测DNA合成、细胞表面激活抗原表达以及胞内细胞因子分泌。包括在BrdU存在下培养激活的单个核细胞,固定通透后,以抗BrdU荧光抗体检测BrdU的摄取。同时,以适宜浓度的DNA酶使胞内DNA变性,加强掺入BrdU与抗体的亲和力,同时保留胞内蛋白结构和荧光素荧光强度。此方法避免了DNA变性条件与胞内及表面标志同时检测条件的冲突。持续的BrdU的掺入可以用于确定和分析处于DNA合成活跃状态的细胞,区分于那些处于静止期的细胞,从而进行细胞增殖比例的分析;另一方面,不同时间点加入BrdU,可以分析细胞周期动力学。
BrdU掺入研究已在很多实验中得到广泛开展,包括体外和体内标记实验。
注意事项:该品对肌体有不可逆损伤的可能性。使用时应穿防护服和戴手套。应避免吸入本品的粉尘。