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S25173

Cy5

源叶 ≥95%
  • 英文名:
  • Cy5 acid
  • 别名:
  • Cy5
  • CAS号:
  • 1032678-07-1
  • 分子式:
  • C32H39ClN2O2
  • 分子量:
  • 519.12
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  • 介绍:

     原液制备

    1. 蛋白准备
    为了获得最佳标记效果,请将蛋白 (抗体)必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的pH8.5缓冲液中溶解,浓度配制为 2 mg/mL。若 pH 低于 8.0,则用 1 M 碳酸氢钠进行调整。蛋白浓度低于 2 mg/mL,标记效率会大大降低,为了获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。
    2. 染料准备
    将无水 DMSO 稀释 CY 染料,制成 10 mM 储备溶液。通过玻璃管或旋涡充分混合。CY 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存,不能反复冻融。(荧光染料溶液稳定性比较差,建议最好现配现用,或者配制少量储备液)
    3. 染料工作液用量计算
    标记反应所需的 CY 染料用量取决于要标记蛋白的用量,CY 染料与蛋白的最佳摩尔比为 10 左右。
    例:假如所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY5 染料,则所需 CY5 体积为 3.48 μL,详细计算流程如下 (以 CY5 为例) :
    1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol
    2) mmol (CY5 ) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol
    3) μL (CY5 ) = mmol (CY5 ) ×MW (CY5 ) / mg/μL (CY5 ) = 6.7×10-5 mmol× 519.12 mg/mmol / 0.01 mg/μL =3.48 μL (CY5)
    使用方法
    1. 标记反应
    1) 取算好体积的新鲜配制的 10 mg/mL CY 染料缓慢加入到 蛋白样品溶液中,轻轻摇匀混合,然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀,防止蛋白样品变性失活。
    2) 将该反应小管置于避光处,在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 分钟,每隔 10–15 分钟,将反应小管轻轻颠倒几次,以充分混合两种反应物,提高标记效率。
     
  • 储存条件: 2-8℃
  • 注意:部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用。
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质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子量 (g/mol)


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