如何正确用 Marker 估读目标条带分子量？_产品介绍

为什么同一块胶，Marker 会影响你对分子量的判断？

本文主要介绍为什么蛋白分子量 Marker 的标准曲线会随凝胶浓度、缓冲体系而变化，以及如何正确用 Marker 估读目标条带分子量。

你以为 Marker 是「尺子」，量出来就准？

其实 Marker 给的是「在这块胶、这套条件下」的相对刻度。

换胶浓度、换缓冲体系，尺子就悄悄变了。

定义｜什么是蛋白分子量 Marker？

蛋白分子量 Marker(预染/未染)是已知分子量的一组标准蛋白，与样品同跑 SDS-PAGE，用于根据迁移距离反推样品蛋白的近似分子量。

Marker 的工作原理：迁移率 vs 分子量

SDS-PAGE 中蛋白带均匀负电荷，迁移距离主要取决于分子量(对数关系)。

Marker 各条带已知分子量，连成标准曲线后，用样品条带的位置反查分子量。

注意：这是「近似」，不是精确测定。

变量	对分子量估读的影响
凝胶浓度	高浓度胶对小蛋白分辨好，但大蛋白迁移慢、估读易偏
缓冲体系	Tris-Glycine 与 Bis-Tris 体系迁移行为不同
蛋白修饰	糖基化/磷酸化改变实际迁移，出现「假分子量」
预染与否	预染 Marker 迁移略慢于未染，需校正

为什么「同一块胶」也别盲目信 Marker

即使同一块胶，边缘效应(胶两端散热差)、加样量不均、Marker 与样品泳道离子强度差异，都会让标准曲线局部偏移。

所以跨胶比较分子量时误差更大，需用内参或平行 Marker 校正。

常见误区

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常见问题 FAQ

Q：Marker 为什么会影响分子量判断？

A：Marker 给出的是特定胶浓度与缓冲体系下的相对刻度，换条件标准曲线会变，估读随之偏移。

Q：怎么用 Marker 估读才靠谱？

A：样品与 Marker 同板同条件跑，用软件拟合标准曲线，跨实验以内参校正。

Q：预染和未染 Marker 能混用吗？

A：预染蛋白迁移略慢，混用会引入偏差，建议同次实验统一类型。

Q：为什么糖基化蛋白分子量会估错？

A：糖链改变迁移行为，SDS-PAGE 估读会偏离真实质量，需用质谱确认。

Q：凝胶浓度怎么选？

A：小蛋白用高浓度胶(如 15%)，大蛋白用低浓度胶(如 8%)，通用可选 10-12%。

Q：WB 能给出精确分子量吗？

A：不能，WB 只能估读近似分子量；精确质量数需借助质谱。

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