Name: Ni-NTA 6FF 树脂
Brand: 源叶生物
SKU: R43621
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产品介绍

Ni-NTA 6FF Resin 以琼脂糖微球为基质，通过活化偶联次氮基三乙酸（NTA），再螯合 Ni2+所形成的稳定八面体结构。与亚氨基二乙酸（IDA）相比，具有更好的螯合剂、还原剂、碱性的耐受性，如样品中含有1-10mM EDTA或1-10mM β-巯基乙醇或5mM DTT，可正常纯化；在螯合镍的情况下，也可以用0.1MNaOH清洗。

Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 主要用于纯化带组氨酸标签（His-Tag）的重组蛋白。纯化原理是利用重组蛋白组氨酸标签的咪唑环可与过渡金属 Ni2+形成稳定的配位键，因此能特异、牢固、可逆地吸附于固定这些金属离子的基质，结合了 His-Tag 重组蛋白的 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 一般通过增加咪唑浓度进行竞争洗脱。

基础参数：

基质

6%琼脂糖凝胶

配基

-N(CH2COOH)3

配基密度

≥15 μmol/ml

填料粒径

60-180 μm

最大流速

800 cm/h

推荐流速

50-100 cm/h

pH 稳定性

pH 5-12，pH 3-13

耐反压

0.3 MPa

载量

≥20 mg His-tag 重组蛋白/ml

使用方法：

1.色谱柱装填

（1）所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。

（2）在柱子下端加入蒸馏水，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的蒸馏水。

（3）将琼脂糖凝胶连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降。

（4）柱压不超过 0.3MPa，如果装柱系统中无法测柱压，则正常流速下填装。

（5）填装好的 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 柱用 2-5 个柱体积的初始缓冲溶液平衡，建议流速 100cm/h，平衡后的柱子可以用于 His-Tag 重组蛋白的上样和洗脱纯化。

2.上样

（1）缓冲液选择：一般选用 pH6-8 的结合缓冲液，常用缓冲液有 10-00mM 磷酸钠缓冲液、20-200mMTris-HCl 缓冲液等。在缓冲液中一般要加入 0.15-0.5M 的 NaCl，以消除离子交换作用。在初次使用 Ni-NTA琼脂糖凝胶 FF，推荐使用 50mM PBS（50 mM NaH2PO4，0.5M NaCl，NaOH 调节 pH 7.4）作为结合缓冲液。

（2）样品处理：样品的缓冲液应与所选结合缓冲液一致。为保证缓冲液一致，可以在结合缓冲液中破碎细菌、或调解 pH 与结合缓冲液一致、或交换至结合缓冲液（常用方法有透析、超滤、脱盐柱换液等）、或用结合缓冲液稀释 2-10 倍等。样品上柱前应 0.45μm 过滤。

3.洗脱

（1）Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 最常用的洗脱方法为增加咪唑浓度进行洗脱。

（2）咪唑为碱性，相应缓冲液配制后需要用 HCl 进行调节 pH。

（3）在初次使用 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF，不知道洗脱的咪唑浓度，建议在结合缓冲液中分别加入 10mM、20mM、50mM、100mM、200mM、500mM 咪唑，浓度从低到高，分别洗脱和收集，通过 SDS-PAGE 电泳等方法鉴定洗脱组份。

（4）有条件的也可以进行线性咪唑梯度洗脱，确定较佳洗脱条件。

4.在位清洗

在多次使用后需要在位清洗，常用方法为先 5 个柱体积蒸馏水清洗，再用 1-3 个柱体积 50mM NaOH 清洗10-20min，立即用 5 个柱体积结合缓冲液（50mM PBS）清洗平衡。

用途：

超高刚性

超高刚性琼脂糖基球，耐压骨架支持高流速、大规模的工业化生产

动态载量高

流速下依旧可以保持超高的动态结合能力和特异性吸附效率

产品种类丰富

提供研发及生产阶段的完整解决方案

注意事项：

1. 本产品仅限科学研究使用，不得用于临床诊断和治疗等领域。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：	2-8°C,避免反复冻融
有效期：	36个月
注意：	部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。

参考文献(2篇)

2. [IF=5.1] Yiwei Dai, et al. "Enzymatic Properties of Chitosanase from Bacillus velezensis YB1534 and Antibacterial Activity of Its Oligosaccharide Products"Foods, 2026 Feb;15(3):575 1. [IF=6.8] Tong Wang, et al. "Establishing biosynthetic pathways for the production of nicotinic acid and trigonelline in Escherichia coli"METABOLIC ENGINEERING, 2026 Jul;96:268-276

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