蛋白A琼脂糖

产品介绍

蛋白A琼脂糖通过偶联的Protein A配基特异性地与抗体的Fc区结合，经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。 蛋白A琼脂糖以琼脂糖凝胶为基质，以重组Protein A为配基，具有很高的物理化学稳定性，配基不易脱落，寿命长，使用方便，应用广泛。 产品特性 参数指标基质琼脂糖配基r-Protein A形状球形介质平均粒径90 μm (45-165)配基密度6mg Protein A/ml wet gel动态载量30-40mg 兔IgG/ml wet gel最高流速（25℃）500 cm/h最高耐压0.3 MPa (3 bar)pH稳定性3~12（长时间）；2~13（短时间） 保存4~8 ℃（20%乙醇） 应用蛋白A琼脂糖广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。平衡：用5~10CV的平衡缓冲液（20 mM PB+0.15M NaCl，pH 7.0，添加适当浓度的NaCl抑制非特异性吸附）平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。　　进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤（0.45μm）处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量来确定。淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。洗脱：用洗脱缓冲液（20 mM乙酸钠，pH 3.0-4.0或0.1M甘氨酸，pH 3.0）洗脱，收集流出液。洗脱后，应立刻用碱性缓冲液（如1M Tris/HCl, pH 9.0）将收集到的抗体溶液中和到中性，避免抗体失活，维持抗体的生物活性。再生、原位清洗：介质使用数次（5-10次，具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行再生、在位清洗。（1）用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用；（2）也可用0.05M NaOH+1M NaCl或6M盐酸胍淋洗柱子3-5CV，并用3~10 CV的纯水冲洗，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。其它注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。