产品介绍
产品介绍:1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。 2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min。 3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。 4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,RedNucleus II摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 Annexin V-PE的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTA,EDTA 会影响 Annexin V 与 PS 的结合。 5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。 6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。 7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。 8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。产品参数:Annexin V-PE:Ex/Em=488/578 nm RedNucleus II:Ex/Em=635/695 nm注意事项:1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。 2. 为降低细胞凋亡进程,孵育过程可在冰上操作,但孵育时间至少延长至30 min。 3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后 1 h之内进行分析。 4. 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,RedNucleus II摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 Annexin V-PE的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTA,EDTA 会影响 Annexin V 与 PS 的结合。 5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色,避免假阳性。 6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。 7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。 8. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。应用范围:早期凋亡检测、Annexin V Kit