产品介绍
报告基因已被细胞生物学广泛使用以研究基因表达及其它与基因表达相关的细胞学事件,如受体活性、细胞内信号传导、mRNA 加工、蛋白质折叠及蛋白-蛋白相互作用等。萤火虫荧光素酶是基因表达中最常用的报告基因之一,是一种极度灵敏、响应快速且易于使用的报告基因,所催化的化学发光反应是测量基因表达最敏感的分析工具之一。萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61 kDa的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,能够催化萤光素(luciferin)氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光,该萤光可通过化学发光仪进行测定。高亮版萤火虫萤光素酶一步检测试剂盒(即用型)是无需洗涤或收集细胞的通过化学发光法直接测定细胞内萤火虫萤光素酶活性的超高灵敏度、高信号稳定性的一步法检测试剂盒。该试剂盒提供即用型萤火虫萤光素酶检测试剂,按照与培养液等体积的比例加入到细胞培养板内反应5分钟,即可进行化学发光检测。本试剂盒使用灵活便捷、检测灵敏度高并且发光信号比较稳定,信号半衰期为0.5-1小时。
注意事项:
1、 萤火虫荧光素酶检测试剂应尽量避免多次反复冻融。建议第一次使用时适当分装,然后避光保存于-80℃。
2、 酶促反应对温度较为敏感,加样检测前需将细胞培养板和检测试剂平衡至室温。
3、 检测仪器选择:能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测,但是针对相同的样品,不同检测器本底信号值和测量值均可能不同;且对于同一样本检测,不同仪器的数值不可横向比较。
4、 为防止孔间干扰,推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
使用说明:
1. 细胞裂解
1) 贴壁细胞:不用吸除细胞培养基,直接加入与培养基等体积的检测试剂。悬浮细胞:同贴壁细胞。
2) 推荐使用量:器皿类型96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板培养基体积 (μl/孔)100150200300500检测试剂体积 (μl/孔)1001502003005003) 室温条件下,在微型震荡器上或静置裂解5min。
2. 加样96孔板样品可直接进行后续检测,其他类型样品每孔吸取200μl混合液(培养基+检测试剂)到检测板。
3. 检测启动化学发光检测仪或具备化学发光功能的多功能酶标仪,根据仪器说明书及实验需求进行参数设置,随后上机读取信号值。