StableMax RT-qPCR Master Mix (UDG, One Tube)

产品介绍

StableMax RT-qPCR Master Mix (with UDG) 是一款一管式探针法RT-qPCR专用预混液，适用于 RNA 单/多重项目的荧光定量 PCR检测。经优化，本产品的缓冲体系具有同时适合 Taq 酶与逆转录酶扩增的优势，体系的项目普适性强。此外，体系具有高度稳定性，在本产品中添加引物探针后配制成的预混工作液能在低温下长期保存且不影响体系的扩增性能，使用时在预混工作液中直接添加待测样品即可上机检测，简单便捷，即需即用。

此外，预混液中引入了 dUTP/UDG 防污染系统，在上机扩增前可消除遗留扩增产物的污染，从而保证结果的准确性。除常规程序，本产品也兼容快速程序，可大大缩短检测时间。

适用范围：适用于RNA一步法扩增或热启动DNA扩增。

产品优势：
1、全新研发的Buffer缓冲系统，同时对Taq酶与逆转录酶友好；
2、加入引探即可制成成品预混液，检测时加入样本即可；
3、引入dUTP/UDG防污染系统，可有效防止气溶胶污染；
4、可适配快速和多重靶标扩增，普适性强。

使用说明：

1、反应体系配制：

1.1 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液，瞬时离心后，放置室温待用，探针建议避光处理。建议将PCR液体分装使用，避免反复冻融。
1.2 参照下表配制PCR反应体系：

注1：引物以及模板的用量可自行调整；
注2：使用快速反应程序时，建议将反应体系总体积设置为 25 μL。

1.3 用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀，室温离心数秒，使液体聚于管底。
1.4 将各 PCR 反应管置于设置好的 PCR 仪上，开始 PCR 反应。

a. 对于第一步 50℃逆转录反应，可根据项目调整时间，时间建议在 5-15 min 之间。
b. 对于第二步 95℃预变性反应，建议在 1.5-2.5 min 之间。
c. 对于大多数实验，45 个循环数是足够的，若您的样本本身靶标含量较高，可适当减少循环数如 40 个循环，缩短检测时间；
d. 通常各引物使用的终浓度为 0.2 μM，引物的 Tm 值一般设定在 55℃以上，可借助相关软件进行分析，使用理想的引物浓度和退火温度可以得到理想的反应效果。