T4 DNA 聚合酶

产品介绍

从一种携带有高表达 T4 DNA Polymerase 基因的大肠杆菌（E. coli）中提纯制备。 T4 DNA Polymerase，即 T4 DNA 聚合酶，是一种模板依赖的 DNA 聚合酶，可以在结合有引物的单链 DNA 模板上，从 5'→3' 方向催化 DNA 合成反应。T4 DNA Polymerase 具有 3'→5' 外切酶活性，但不具有 5'→3' 外切酶活性，其 3'→5' 外切核酸酶活性比 E. coli DNA 聚合酶 I 强。主要应用于 DNA 5' 或 3' 突出末端的平滑化、定点突变过程中第二链的合成以及不依赖于连接反应的 PCR 产物克隆等方向中。组分表FP1508928 组分300U3KU30KU存储温度FP1508928A T4 DNA Polymerase (3U/μL)100 μL1.0 mL10 mL-20℃FP1508928B 10 ×T4 DNA Polymerase Buffer1.0 mL10×1.0 mL100 mL-20℃FP1508928CSolution I (100×)100 μL1.0 mL10 mL-20℃适用范围1. 缺口填充（无链置换活性），产生平末端；2. 补平 5' 突出端，形成平末端；3. 切除 3' 突出末端，形成平末端；4. 通过置换合成法标记探针；5. 单链删除后亚克隆；6. 基因定点突变中第二条链的合成。
注意事项1. 由于该酶具有 3'→5' 外切酶的活性，提高反应温度、增加酶量、没有加入 dNTP 或反应时间过长都可能造成 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。2. 使用该酶时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于 - 20℃保存。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法 反应体系配制前准备：a. 4℃溶解反应所需的各种试剂，并放置于冰浴上或冰盒内使用。建议反应液体分装使用，避免反复冻融。b. 可参考下表中的末端修复体系设置反应体系，建议在冰浴或在冰盒上进行体系配制： 组分体积终浓度10×T4 DNA Polymerase Buffer5 μL1×dNTP Mix* (25 mM)0.4 μL0.2 mMSolution I (100×)0.5 μL1×T4 DNA Polymerase (3 U/μl)—**—反应物—**—ddH₂OTo 50 μL—终体积50 μL—
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10×T4 DNA Polymerase Buffer 不包含 dNTP Mix，需客户自备。 ** 建议每微克 DNA 底物添加 1U 的 T4 DNA Polymerase。反应程序（以末端修复为例）步骤名称温度时间反应12~37℃15~30 min灭活75℃20 min保存4℃∞注：可根据具体底物用量及酶量调整反应温度及时间。