Hotstart HiTaq HS III One-step RT-PCR Mix

产品介绍

酶系（Hotstart HiTaq& Script III）以其卓越的快速性及定量性被广泛应用，使用该产品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行，操作简单，并能有效防止污染。本制品中使用了 具有更高的热稳定性反转录酶（HS Script III RTase）和化学修饰热启动酶（Hotstart HiTaq DNA Polymerase），具有高扩增效率和高扩增特异性，能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应，大大提高了检测灵敏度，并省略了PCR反应后的电泳步骤，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。

本制品专为进行便利、高灵敏度的一步式RT-PCR设计。其独特的酶和特别设计的缓冲液确保了逆转录和PCR反应高效、准确的进行，无需进行优化。可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲 线，对靶基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。

适用范围：适用于RNA一步法扩增或热启动DNA扩增。

使用方法

1. 反应体系配制

1.1 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液，瞬时离心后，放置室温待用，探针建议避光处理。建议将PCR液体分装使用，避免反复冻融。

1.2 参照下表配制PCR反应体系：

※注：Primer-probe Mix和Templates的用量可自行调整。

1.3 用移液器轻轻吹打混匀或轻微Vortex混匀，室温离心数秒，使液体聚于管底。

1.4 将各PCR反应管置于设置好的PCR仪上，开始PCR反应。

2. 反应程序

注：

(1) 通常各引物使用的终浓度为0.2 μM，引物的Tm值一般设定在55℃以上，可借助相关软件进行分析，使用理想的引物浓度和退火温度可以得到理想的反应效果。

(2) 对于大多数实验，45个循环数是足够的，若您的样本本身靶标含量较高，可适当减少循环数如40个循环，缩短检测时间。