产品介绍
通用型ELISA溶液套装(Universal ELISA Buffer Set),是一种包含了双夹心ELISA等ELISA实验过程中常用的包被液、封闭液、洗涤液、通用稀释液、显色液和终止液的溶液套装,可满足常规ELISA的溶液需求。用户仅须自备ELISA检测用抗体(如使用生物素体系,须自备生物素检测相关试剂)和酶标板及封板膜(如需进行绝对定量,还须自备标准品),就可以进行ELISA检测。 ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)即酶联免疫吸附试验,是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用的高敏感性免疫学实验技术,广泛用于生物学和医学科学等的许多领域。常见的ELISA有双抗体夹心ELISA (Sandwich ELISA)、竞争ELISA (Competitive ELISA)、直接ELISA (Direct ELISA)、间接ELISA (Indirect ELISA)等。双抗体夹心ELISA,简称双夹心ELISA,是最常见的ELISA检测方式之一,可用于检测样品中靶蛋白等目标分子的浓度。使用说明ELISA的步骤参考ELISA试剂盒说明书。以下为本试剂盒中各个溶液的常规
使用方法,具体可根据实际情况进行条件的优化。1. 包被液。无须稀释或配制,直接使用。使用包被液将捕获抗体稀释至合适浓度,100μl/孔加入到空白酶标板中,4ºC孵育过夜,或者37ºC孵育2小时。2. 封闭液。无须稀释或配制,直接使用。包被完成后,用洗涤液(1X,配制方法见步骤3)洗涤3次。加入200μl/孔封闭液,室温封闭120分钟,甩去孔内液体,拍干后直接进行一抗孵育等后续操作;或室温封闭2小时,甩去孔内液体,拍干后置于37ºC倒扣烘干90分钟,即可作为预包被板使用。预包被板封装在含有干燥剂的密闭防潮袋中,或在其它适宜的保存环境中,通常置于4ºC可保存约六个月。3. 洗涤液(10X)。a. 以配制1升洗涤液(1X)为例:将10ml洗涤液(10X),倒入到一洁净的量筒中,加入蒸馏水混匀并定容到100mL后即为洗涤液(1X),即可用于ELISA的洗涤。没有用完的洗涤液可以室温保存,通常1-2周内可正常使用,如需长时间保存,请将未使用完毕的洗涤液在4ºC保存,通常2个月内可正常使用。如果发现洗涤液出现浑浊、沉淀等异常现象,宜废弃。b. 自动洗板机或手工洗板:每孔洗涤液为300μl,注入与吸出间隔15-30秒。洗板3-5次。最后一次洗板完成后将板倒扣在厚吸水纸上适当用力拍干。然后进行后续的操作。如果按照上述洗涤条件ELISA结果空白孔的信号值仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对ELISA结果产生负面影响。4.显色液。将显色液A、B、C按照5:4:1比例配制。在SA-HRP或其它HRP标记抗体孵育后,用洗涤液(1X)洗涤3-5次,洗涤完毕后,去除洗涤液,加入100μl/孔显色液,室温显色5-30分钟,直至显色至预期深浅。本产品反应速度较快,如有必要可适当缩短反应时间。6. 终止液。无须稀释或配制,直接使用。加入100μl/孔终止液终止反应,随后在测定吸光度。使用终止液终止反应后在1小时内吸光度保持稳定。
注意事项1. 本套装产品仅提供各种溶液,高结合力酶标板、封板膜、封板膜刮板等需要自备)。2. 使用前,将试剂盒内的溶液从4ºC冰箱取出,恢复至室温使用。3. 使用时建议将各组分吸出或倒出所需用量使用,尽量避免直接从瓶中进行移液操作;未使用的多余溶液请勿倒回。4. 洗涤液(10X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。 洗涤液(10X)配制成1X洗涤液后,宜4ºC保存,并在1-2个月内用完,如果室温保存,宜在1-2周内用完。5. 如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成蓝色,应该停止使用。6. 加入TMB显色液或者终止液后,如果有沉淀生成,说明样品中目的蛋白的含量过高,建议适当稀释后再进行测试。7. 终止液有腐蚀性,操作时请小心,并确保有效防护以避免直接接触人体,并须注意避免腐蚀其它物品。8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。