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HIS-HIS-HIS-HIS-HIS-HIS

    
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HHHHHH

源叶(MedMol)
V39697 一键复制产品信息
64134-30-1
C36H44N18O7
840.85
Hexa-His
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V39697-1mg
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¥3430.00

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¥4620.00

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产品介绍 参考文献 质检证书(COA) 摩尔浓度计算器 相关产品
产品描述: Hexa-His (6X His Tag) 是一种常用的亲和标签,由六个组氨酸残基组成。HEXA-HIS 可以与含有镍离子 (Ni) 或钴离子 (Co) 等过渡金属离子的亲和层析介质结合,从而用于蛋白质的纯化。
体外研究: Hexa-His 用于蛋白纯化和蛋白分析
(1) 构建含有目的基因和 Hexa-His 标签的质粒并转入大肠杆菌中。
(2) 挑选阳性克隆,在 LB 培养基中培养至 OD 600 约为 0.6-0.8 后,加入 IPTG (,异丙基 β-D-硫代半乳糖苷) 诱导剂,继续培养几小时以诱导目标蛋白的表达。
(3) 收集细菌细胞,用裂解缓冲液重悬并超声破碎细胞,离心去除碎片得到上清液。
(4) 装填好 Ni-NTA 亲和层析柱,将裂解后的上清液缓慢通过 Ni-NTA 柱,使带有 Hexa-His 标签的 CTB 蛋白结合到柱子上。
(5) 蛋白质吸附后,使用 10 个柱体积的 60 mM 咪唑的结合缓冲液洗涤树脂。目的基因用 5 个柱体积 1 M 咪唑溶液洗脱。收集蛋白并通过 15% SDS-PAGE 进行分析。
参考文献: 1. Watly J, et al. Insight into the coordination and the binding sites of Cu(2+) by the histidyl-6-tag using experimental and computational tools. Inorg Chem. 2014 Jul 7;53(13):6675-83.
2. Ana Paula de Mattos Arêas, et al. Synthesis of cholera toxin B subunit gene: cloning and expression of a functional 6XHis-tagged protein in Escherichia coli.Protein Expr Purif.2002 Aug;25(3):481-7.
保存条件: -20℃,氮气保存
配置溶液浓度参考:
1mg 5mg 10mg
1 mM 1.189 ml 5.946 ml 11.893 ml
5 mM 0.238 ml 1.189 ml 2.379 ml
10 mM 0.119 ml 0.595 ml 1.189 ml
50 mM 0.024 ml 0.119 ml 0.238 ml
注意: 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用。

参考文献

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批号:JS298415 货号:S20001-25g
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