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产品描述：

Hoechst 34580 tetrahydrochloride is a marker dye in Hoechst series. Hoechst is A live nuclear marker dye. Hoechst binds to the grooves in the DNA double strand, which tends to be A/ T-rich DNA strand. Although it binds to all nucleic acids, the A/ T-rich double strand DNA significantly enhances fluorescence intensity Therefore,Hoechst dye can be used for living cell labeling. The fluorescence intensity of Hoechst dye increases with the increase of pH of solution.

靶点：

Amyloid-β

体外研究：

实验步骤
Hoechst 工作液的制备
1.1 储备液的制备
取10 mg 溶于5 mL ddH2O
注意：建议储备液在4°C或-20°C避光保存，避免反复冻融。
1.2 Hoechst工作液的制备
稀释储备液在无血清细胞培养基或PBS中溶解，得到终浓度为10μg/mL的Hoechst工作液。
注意：请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度。
1.细胞染色
2.1 悬浮细胞 (6孔板)
a．在 4°C 下以 1000 g 离心 3-5 分钟，然后弃去上清液。PBS洗涤2次，每次5分钟。细胞密度为1×106/mL。
b．加入1 mL工作液，室温孵育3-10分钟。
c． 4℃、400g离心3-4分钟，弃上清。
d．用PBS洗涤2次，每次5分钟。
e．用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞术观察。
2.2 贴壁细胞
a．在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
b.从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。
c.加入100 μL工作液，轻摇使之完全覆盖细胞，室温孵育3-10分钟。
d．用培养基洗涤2次，每次5分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。

保存
4℃，1年。避光

注意事项
1、请根据实际情况调整Hoechst工作液的浓度。
2、本品供R&D使用仅供使用，不得用于药物、家庭或其他用途。
3. 为了您的安全和健康，请穿着实验服和一次性手套进行操作。

参考文献：

1. Thai NQ, et al. Discovery of DNA dyes Hoechst 34580 and 33342 as good candidates for inhibiting amyloid beta formation: in silico and in vitro study. J Comput Aided Mol Des. 2016 Aug;30(8):639-50.

保存条件：

2-8°C, 干燥, 避光

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	1.674 ml	8.369 ml	16.739 ml
5 mM	0.335 ml	1.674 ml	3.348 ml
10 mM	0.167 ml	0.837 ml	1.674 ml
50 mM	0.033 ml	0.167 ml	0.335 ml

注意：

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参考文献

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