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V47339-1mg

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产品描述：

Geldanamycin-FITC, a Geldanamycin fluorescent probe, can be used in a fluorescence polarization assay for HSP90 inhibitors. Geldanamycin-FITC also can be used for detection of cell surface HSP90 (Ex/Em = 488/515 nm).

体外研究：

1. 溶液配制
1.1 原液配制
溶剂：DMSO
浓度：1-10 mM (根据实验优化)。
储存：分装后避光保存于 -20°C 或 -80°C。避免反复冻融。
1.2 工作液制备
用缓冲液 C 稀释至 1 nM-10 µM (根据实验优化)。
注意：工作液应立即配制并使用，并避光保存。

2. 竞争结合实验
2.1 加入 HsHsp90 和 PfHsp90，终浓度分别为 32 nM 和 60 nM。 2.2 在 384 孔微孔板中，将含有 1 nM Geldanamycin-FITC 的实验混合物溶于缓冲液 C (20 mM HEPES，pH 7.3，50 mM KCl，5 mM MgCl2，20 mM Na2MoO4，2 mM DTT，0.1 mg/mL 牛生长球蛋白，0.01% NP-40) 中。
2.3 最终测定体积为 50 μL。
2.4 将板在 4°C 下孵育过夜，然后离心。
2.5 使用 EnVision 系统上的 480 nm 激发滤光片和 535 nm 发射滤光片测量每个孔中的荧光偏振 (FP) 信号。

保存条件：

-20°C, 避光

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	0.967 ml	4.835 ml	9.669 ml
5 mM	0.193 ml	0.967 ml	1.934 ml
10 mM	0.097 ml	0.483 ml	0.967 ml
50 mM	0.019 ml	0.097 ml	0.193 ml

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参考文献

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