| 产品描述: | α-Synuclein aggregate binder 1 (Compound C05-05) is a specific binder for α-synuclein aggregates and can inhibit α-synuclein aggregation. α-Synuclein aggregate binder 1 can be used as a fluorescent probe (excitation wavelength 900 nm, detection wavelength 500-550 nm) for optical imaging, and can also inhibit α-synuclein fibril formation by blocking the aggregation process. α-Synuclein aggregate binder 1 can be used for positron emission tomography (PET) imaging after being labeled with 18F. α-Synuclein aggregate binder 1 can be used for visual diagnosis of brain lesions and mechanism research of neurodegenerative diseases such as Parkinson's disease and Lewy body dementia. |
| 靶点: |
α-synuclein Aggregation |
| 体外研究: |
生物体内双光子激光扫描荧光显微镜检查:α-Synuclein aggregate binder 1 (C05-05) (静脉注射;90 min 后检测) 在模型小鼠脑内特异性富集于 α 突触核蛋白病变区域,检测波长 500-550 nm,成像对比度优于 tau 蛋白 PET 探针 PBB3 [1]。 实验详情[1]: 向 α 突触核蛋白纤维接种 6 周的模型小鼠尾静脉注射 50 μL 含 0.05% C05-05 的 DMSO 生理盐水溶液。 90 min 后腹腔注射磺酰罗丹明 101 。 以 900 nm 激发光进行双光子成像,检测波长分别为 500-550 nm (C05-05) 和 573-648 nm (对照)。 |
| 体内研究: |
小鼠脑光学成像实验:α-Synuclein aggregate binder 1 (C05-05) (30 μM;30 min) 在 α 突触核蛋白纤维接种小鼠脑切片中,与磷酸化 α 突触核蛋白病变区域特异性结合,荧光信号与抗磷酸化 α 突触核蛋白抗体染色区域重叠。 PET 成像实验:18F 标记的 C05-05 在正常小鼠脑内显示适当的脑穿透性和清除速度,在 α 突触核蛋白纤维接种模型小鼠纹状体中特异性聚集。 α 突触核蛋白聚集阻碍实验:C05-05 (20 μM/200 μM;振荡培养 24 h) 呈剂量依赖性抑制 α 突触核蛋白聚集体形成,200 μM 时抑制率达 60%。
不同实验目的的操作步骤和方法 (1)人脑/小鼠脑切片荧光分析: 将 20-6 μm 厚脑切片与 30 μM C05-05 在 50% (人脑) 或 20% (小鼠脑) 乙醇溶液中室温孵育 30 分钟。 依次用乙醇和超纯水洗涤,封片。 封片后通过荧光显微镜 (激发波长 900 nm,检测波长 500-550 nm) 观察病变区域荧光信号。
(2)小鼠 PET 成像: 向麻醉小鼠静脉注射 18F-C05-05 (24.3±0.7MBq),立即进行 90-120 min 放射扫描。 通过 Fourier 重组和最大后验概率法重建图像,分析纹状体和中脑的放射性分布。
(3)α 突触核蛋白聚集阻碍实验: 在 A53T 突变型 α 突触核蛋白单体溶液 (1 mg/mL) 中加入 C05-05 (终浓度 20μM 或 200 μM) 和蛋白聚集体。 37°C 振荡培养 24 h,加入肌氨酸处理。 超速离心后,通过电泳和 CBB 染色定量不溶性聚集体。 |
| 保存条件: |
-20°C |
| 配置溶液浓度参考: |
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1mg |
5mg |
10mg |
| 1 mM |
2.608 ml |
13.04 ml |
26.08 ml |
| 5 mM |
0.522 ml |
2.608 ml |
5.216 ml |
| 10 mM |
0.261 ml |
1.304 ml |
2.608 ml |
| 50 mM |
0.052 ml |
0.261 ml |
0.522 ml |
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| 注意: |
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