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产品描述：

AZD9496 deacrylic acid phenol is a fragment of target protein ligand of PROTAC ER Degrader-4 .

体外研究：

实验方案
1. 蛋白制备
1) 为获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制成 2 mg/mL。
2) 蛋白溶液的 pH 值为 6.5±0.5。
3) 如果蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率会显著降低。为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白浓度范围为 2-10 mg/mL。
2. 染料制备
将无水 DMSO 加入 ICG Maleimide 溶液中，配制成 10 mM 的原液。用移液器吹打或涡旋振荡混匀。
3. 染料用量计算
反应所需的 ICG Maleimide 用量取决于待标记蛋白质的量，ICG Maleimide 与蛋白质的最佳摩尔比约为 10。
示例：假设蛋白质浓度为 10 mg/mL，分子量约为 200 kDa，则蛋白质浓度约为 0.05 mM。 4. 进行偶联反应
1) 将 5 µL 染料原液 (10 mM) 加入装有 95 µL 蛋白质溶液的小瓶中，并充分摇晃。
在溶液中轻轻摇晃混匀，然后短暂离心，将样品收集到反应管底部。不要充分混匀，以防止蛋白质样品变性和失活。
2) 将反应管置于暗处，室温下轻轻孵育 60 分钟，每隔 10-15 分钟轻轻颠倒反应管数次，使两种反应物充分混合，提高纯化效率。
5. 纯化偶联物
以下方案是使用 SepHadex G-25 柱纯化染料-蛋白质偶联物的示例。
1) 根据制造商说明准备 SepHadex G-25 柱。
2) 将反应混合物上样至 SepHadex G-25 柱的顶部。
3) 当样品刚好流到树脂顶部表面以下时，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。
4) 向所需样品中加入更多 PBS (pH 7.2-7.4)，完成柱的制备。纯化。合并含有所需染料-蛋白质结合物的级分。

保存条件：

-20°C, 氮气保存

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	2.574 ml	12.872 ml	25.745 ml
5 mM	0.515 ml	2.574 ml	5.149 ml
10 mM	0.257 ml	1.287 ml	2.574 ml
50 mM	0.051 ml	0.257 ml	0.515 ml

注意：

部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。

参考文献

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