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产品描述：

KMG-301AM TFA is the acetoxy methyl esterified form of KMG-301. KMG-301AM TFA successfully accumulates in mitochondria and then it is hydrolyzed to KMG-301. KMG-301 is an Mg2+-selective fluorescent probe functional in mitochondria in intact cells. Since the mitochondrial membrane is impermeable to KMG-301, it is not released upon depolarization of the mitochondrial membrane potential. KMG-301 can indicate changes in mitochondrial Mg2+ concentration and shows Mg2+ transport across the mitochondrial membrane in the early phases of a cellular model.

体外研究：

实验方案：本方案仅提供一个指导，应根据您的具体需要进行修改。
1、对于光学成像，将 20 µM KMG-301AM TFA 与 Hanks 平衡盐溶液 (HBSS) 中的细胞一起孵育，在冰上放置 10 分钟，以避免细胞质中存在的酯酶水解乙酰氧基甲酯。
HBSS 包含 (mM)：NaCl，137：KCl，5.4；CaCl2，1.3；MgCl2，0.5；MgSO4，0.4；Na2HPO4，0.3；KH2PO4，0.4；NaHCO3，4.2；D-glucose，5.6；HEPES，5 (用 NaOH 将 pH 调节至 7.4)。
2、用 HBSS 洗涤细胞两次，并在 37°C 下孵育 15 分钟，以使线粒体中的乙酰氧基甲酯形式完全水解。
3、如果您想同时使用 KMG-104AM 和 KMG-301AM TFA，请将细胞与 5 µM KMG-104AM 在 HBSS 中于 37°C 孵育 30 分钟，然后用 KMG-301AM TFA 染色。
4、将分离的线粒体与 20 µM KMG-301AM TFA (溶于线粒体成像缓冲液 (MIB)) 在 37°C 下孵育 20 分钟。然后用 MIB 洗涤线粒体两次，并在 37°C 下进一步孵育 15 分钟。
MIB 包含 (mM)：KCl，125；K2HPO4，2；MgCl2，1；HEPES，5；EDTA，0.02 (用 KOH 将 pH 调节至 7.2) 或不含 Mg2+ 的 MIB (不含 MgCl2)。
5、使用共焦激光扫描显微镜系统进行荧光成像实验。KMG-301 由激光二极管在 559 nm 处激发，并在 600-700 nm 处观察信号。
在双染色中，KMG-104 和 KMG-301 分别在氩激光的 488 nm 和 559 nm 处被激发。使用 560 nm 二向色镜分离荧光并分别在 500-545 nm 和 600-700 nm 处观察。

保存条件：

-20°C, 避光, 氮气保存

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	1.564 ml	7.818 ml	15.635 ml
5 mM	0.313 ml	1.564 ml	3.127 ml
10 mM	0.156 ml	0.782 ml	1.564 ml
50 mM	0.031 ml	0.156 ml	0.313 ml

注意：

部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。

参考文献

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