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V49076-50μg

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产品描述：

CM-H2DCFDA is a derivative of H2DCFDA . CM-H2DCFDA can be used to determine cellular oxidant levels (Ex/Em: 495/530 nm). CM-H2DCFDA is light-sensitive.

体外研究：

指南 (以下是我们推荐的方案，本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改)。
1.1 制备储存液
用无水 DMSO 配制 5 mM 的 CM-H2DCFDA 储备液。
注：CM-H2DCFDA 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 CM-H2DCFDA工作液。
注：请根据实际情况调整 H2DCFDA 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。
2.2 加入 1 mL 染料工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
注：若需要用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化重悬后再进行染色。

保存条件：

2-8°C, 避光

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	1.731 ml	8.654 ml	17.307 ml
5 mM	0.346 ml	1.731 ml	3.461 ml
10 mM	0.173 ml	0.865 ml	1.731 ml
50 mM	0.035 ml	0.173 ml	0.346 ml

注意：

部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。

参考文献

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