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V51877-1ml

10mM in DMSO

￥690.00

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体内研究：

DPyPE 与阳离子脂质 VC1052 组成的 Vaxfectin 不促进肌肉组织的 pDNA 转染效率 (如 β- 半乳糖苷酶报告基因表达未增加，甚至后期下降) ，但其通过增强体液免疫应答 (如增加浆细胞数量) 提升疫苗效果。

文献中脂质体复合物的制备及实验操作步骤如下：
1. 脂质体准备
将阳离子脂质 VC1052 和中性脂质 DPyPE 按 1:1 摩尔比分别溶于氯仿，混合后在无菌玻璃小瓶中通过氮气流蒸发溶剂，形成干燥脂质膜。
真空干燥过夜以去除残留溶剂，每瓶含 1.5 μmol 的 VC1052 和 DPyPE。
每瓶加入 1 mL 无菌注射用水 (SWFI)，在漩涡混合器上以最高转速涡旋 5 分钟，形成脂质体溶液 (浓度为 1.5 mM)。
2. pDNA-脂质体复合物制备
将脂质体 (SWFI 中) 和 pDNA (溶于 2× 载体) 分别制备为最终浓度的 2 倍。
按 pDNA (磷酸盐): 阳离子脂质摩尔比为 8:1、4:1 或 2:1，用注射器将等体积的脂质体缓慢注入 pDNA 溶液中，同时用 26-28 号针头匀速推注。
轻柔涡旋混合数秒 (漩涡混合器 4 档) ，形成均匀的脂质体-pDNA 复合物 (室温下可稳定数小时，需在 20 分钟至 1.5 小时内注射) 。
3. 动物注射
小鼠：在清醒状态下，用 28 号针头将 50 μL 复合物注射到股四头肌，每侧肌肉含 1-25 μg pDNA，可配合单次或多次加强注射。
兔子：麻醉后用 22 号针头将 300 μl 复合物注射到股四头肌 (或使用无针注射装置)，剂量为 150 μg pDNA。
4. 检测指标
通过 ELISA 检测血清中抗 NP 抗体滴度，ELISPOT 法计数骨髓中抗原特异性浆细胞，β-半乳糖苷酶活性测定评估肌肉转染效率。

保存条件：

-80℃（运输条件：冰袋低温运输）

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	1.244 ml	6.218 ml	12.435 ml
5 mM	0.249 ml	1.244 ml	2.487 ml
10 mM	0.124 ml	0.622 ml	1.244 ml
50 mM	0.025 ml	0.124 ml	0.249 ml

注意：

部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，仅供客户参考交流研究之用。

参考文献

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