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V53470-1ml

10mM in H2O

￥1290.00

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产品描述：

Hexa-His (6X His Tag) 是一种常用的亲和标签，由六个组氨酸残基组成。HEXA-HIS 可以与含有镍离子 (Ni) 或钴离子 (Co) 等过渡金属离子的亲和层析介质结合，从而用于蛋白质的纯化。

体外研究：

Hexa-His 用于蛋白纯化和蛋白分析
(1) 构建含有目的基因和 Hexa-His 标签的质粒并转入大肠杆菌中。
(2) 挑选阳性克隆，在 LB 培养基中培养至 OD 600 约为 0.6-0.8 后，加入 IPTG (，异丙基 β-D-硫代半乳糖苷) 诱导剂，继续培养几小时以诱导目标蛋白的表达。
(3) 收集细菌细胞，用裂解缓冲液重悬并超声破碎细胞，离心去除碎片得到上清液。
(4) 装填好 Ni-NTA 亲和层析柱，将裂解后的上清液缓慢通过 Ni-NTA 柱，使带有 Hexa-His 标签的 CTB 蛋白结合到柱子上。
(5) 蛋白质吸附后，使用 10 个柱体积的 60 mM 咪唑的结合缓冲液洗涤树脂。目的基因用 5 个柱体积 1 M 咪唑溶液洗脱。收集蛋白并通过 15% SDS-PAGE 进行分析。

参考文献：

1. Watly J, et al. Insight into the coordination and the binding sites of Cu(2+) by the histidyl-6-tag using experimental and computational tools. Inorg Chem. 2014 Jul 7;53(13):6675-83.
2. Ana Paula de Mattos Arêas, et al. Synthesis of cholera toxin B subunit gene: cloning and expression of a functional 6XHis-tagged protein in Escherichia coli.Protein Expr Purif.2002 Aug;25(3):481-7.

保存条件：

-80℃（运输条件：冰袋低温运输）

配置溶液浓度参考：

	1mg	5mg	10mg
1 mM	1.189 ml	5.946 ml	11.893 ml
5 mM	0.238 ml	1.189 ml	2.379 ml
10 mM	0.119 ml	0.595 ml	1.189 ml
50 mM	0.024 ml	0.119 ml	0.238 ml

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