源叶G418 硫酸盐 · 现货速达_产品介绍_上海源叶生物_生化试剂_标准品_小分子化合物

源叶G418 硫酸盐 · 现货速达

日期：2026-10-15

细胞培养 · 稳定转染筛选

稳定转染细胞株构建的"金标准"
源叶 G418 硫酸盐 S17023 完整使用指南

从作用原理到 kill curve，从单抗筛选到多抗共筛，一篇讲透 G418 的实验室全流程使用方案。

一、产品档案

S17023CAS 108321-42-2

G418 硫酸盐 · G418 Sulfate

Geneticin disulfate salt · Aminoglycoside antibiotic · 品牌：源叶

分子式

C₂₀H₄₀N₄O₁₀·2H₂SO₄

分子量

692.71 g/mol

级别 / 效价

BR，600 μg/mg

溶解性

易溶于水

储存条件

2-8℃ 避光

常用工作浓度

100-1000 μg/mL

在售包装规格（详见官网）

货号	包装	规格	官网
S17023-100mg	100 mg	BR，600 μg/mg	查看
S17023-250mg	250 mg	BR，600 μg/mg	查看
S17023-1g	1 g	BR，600 μg/mg	查看
S17023-5g	5 g	BR，600 μg/mg	查看
S17023-25g	25 g	BR，600 μg/mg	查看

规格、库存与质检报告（COA）以源叶官网产品页为准：shyuanye.com/goods-S17023.html

二、作用机制 · 一句话读懂

G418 是一种氨基糖苷类抗生素，结构类似新霉素、庆大霉素。它通过结合 80S 核糖体、阻断蛋白合成，对原核与真核细胞均有杀伤作用。

当细胞携带 neo/kanR 抗性基因（来自 Tn5 转座子，编码氨基糖苷磷酸转移酶）时，能将 G418 磷酸化失活，从而在含 G418 培养基中存活——这是稳定转染筛选的分子基础。

载体设计

含 neo/kanR 基因

→

细胞摄取

转染 / 感染

→

加压筛选

G418 培养 7-14 d

未整合外源基因的细胞被 G418 杀死，整合成功的细胞形成抗性克隆

三、7 大研究应用方向

◆

哺乳动物细胞稳定转染

HEK293、CHO、HepG2、A549 等细胞株稳定转染后筛选阳性克隆，最经典用途。

最常用

◆

慢病毒 / 逆转录病毒系统

pLenti 系列载体常带 neo 抗性，感染后用 G418 筛选稳定整合细胞。

◆

CRISPR-Cas9 KO 筛选

基因敲除后用 G418 维持编辑细胞系压力，避免染色体丢失导致表型回弹。

科研热点

◆

植物转基因筛选

农杆菌介导转化拟南芥、烟草、水稻愈伤组织时，npt-II 基因赋予 G418 抗性。

◆

酵母 / 毕赤酵母筛选

G418 可替代传统营养缺陷型筛选，适合蛋白表达系统的高通量转化子筛选。

◆

昆虫细胞 / 杆状病毒

Sf9、High Five 等昆虫细胞中带 neo 抗性的重组病毒筛选。

◆

双抗 / 多抗共筛

与嘌呤霉素、潮霉素 B 等组合，对双基因 / 多基因共转染细胞进行正交筛选。

◆

细胞压力维持

稳转株长期培养时持续低浓度 G418 维持，防止质粒丢失、保证外源基因稳定表达。

四、各类细胞 Kill Curve 浓度参考

不同细胞对 G418 敏感性差异极大，正式筛选前务必做 7-14 天的 kill curve 实验。下表为常用细胞系的推荐起始浓度（经验值，需以本实验室实测为准）：

细胞类型	筛选浓度 (μg/mL)	维持浓度
HEK293 / 293T	400-600	200 μg/mL
CHO-K1 / CHO-S	400-800	200 μg/mL
HeLa / HepG2 / A549	400-600	200 μg/mL
NIH-3T3 / C2C12	400-500	200 μg/mL
Jurkat / K562（悬浮）	500-800	300 μg/mL
iPSC / 胚胎干细胞	50-150	50 μg/mL
酵母 (S. cerevisiae)	200-500	200 μg/mL
毕赤酵母 (P. pastoris)	500-1000	500 μg/mL
拟南芥愈伤	25-50	25 μg/mL
Sf9 / High Five	500-1000	500 μg/mL

五、标准筛选流程（7 步）

转染 / 感染

用合适方法将含 neo 抗性基因的载体导入细胞，转染 24-48 h。常用试剂见第六部分。

换液去除毒性

转染后 24 h 换新鲜完全培养基，去掉转染试剂对细胞的毒性。

加 G418 加压

48 h 后加入预实验确定的 kill 浓度（贴壁细胞 100-800 μg/mL 不等）。

2-3 天换液一次

期间持续用含 G418 培养基培养，未整合外源基因的细胞逐渐死亡。

观察克隆形成

7-14 天可见抗性克隆长出，每孔 5-20 个克隆为佳。

挑克隆 / 鉴定

用克隆环或有限稀释法挑单克隆，PCR / WB 鉴定外源基因整合与表达。

扩增 + 冻存保种

阳性克隆扩增后用维持浓度（约 1/2 筛选浓度）持续培养，及时冻存早期代次细胞。

▲ 实验小贴士

● G418 在 37℃ 培养基中活性半衰期约 5 天，含 G418 培养基现用现配或 2-3 天换新。

● 母液配制：100 mg/mL 溶于无菌去离子水，0.22 μm 过滤除菌，-20℃ 分装保存，避免反复冻融。

● 死细胞漂浮会影响活细胞，建议筛选期间每日观察并用 PBS 轻柔洗涤。

● 悬浮细胞筛选时密度不能太低（建议 2-5×10⁵/mL），否则大量死亡导致营养耗竭。

● iPSC / 胚胎干细胞敏感，建议从 50 μg/mL 起做梯度，切勿上来用 500 μg/mL。

● 长周期筛选（2-3 周）建议同步做支原体检测，可用支原体检测试剂盒（PCR 法）R43810。

六、5 大类配套产品 · 官网在售清单

以下货号均为源叶官网在售产品，点击产品名称或货号可直达官网页面查看规格、库存与 COA。

━ ① 其它筛选抗生素（多抗共筛）

嘌呤霉素二盐酸盐（来源于白色链球菌）

V34573

BioReagent，细胞培养级 · 10/25/100 mg

嘌呤霉素盐酸盐

V30200

≥98% · 5/25/100/500 mg、1 g

潮霉素 B 溶液

V33764

≥60%(HPLC)，45-60 mg/mL in H₂O · 20 mL

潮霉素 B（来源于吸水链霉菌）干粉

V33766

BioReagent，powder · 50/250 mg、1/5 g

潮霉素 B 溶液（50 mg/mL，PBS，无菌）

细胞培养级，1.5-2 u/mg · 5/10/25/100 mg

灭瘟素 S 盐酸盐

V30030

≥96% · 5/10/25/100/250 mg

新霉素三硫酸盐水合物

V36476

BioReagent，powder · 5/25/100 g

━ ② 转染试剂

脂质体 2000（Lipofectamine 2000）

S30520

BR · 0.75/1.5 mL

脂质体 3000 / Lip3000 转染试剂

无菌，分子生物学级 · 100 μL/500 μL/1 mL

Universal 转染试剂（DNA/RNA 通用型）

1 mg/mL in MES-buffered saline · 400 μL

UltraBio™ 昆虫细胞转染试剂

R44219

无菌，分子生物学级 · 100 μL/500 μL/1.5 mL

━ ③ 慢病毒感染增强

Polybrene 溶液（10 mg/mL）

R41131

1 mL

Polybrene 干粉（Hexadimethrine Bromide）

━ ④ 支原体防控（长周期筛选必查）

UltraBio™ 支原体去除试剂（100×）

无菌 · 200 μL / 5×200 μL

支原体染色液（Dienes 染色液）

R22249

10 mL / 50 mL

━ ⑤ 细胞增殖 / 活力检测

Cell Counting Kit (CCK-8)

R22305

500 T / 10×500 T

Enhanced CCK-8（增强型 CCK-8 试剂盒）

R32254

100 T / 500 T / 1000 T

BR，98% · 250 mg/1 g/5 g/25 g/100 g

MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

R20228

100 T / 500 T / 1000 T / 2500 T

规格、库存与货期以源叶官网实时信息为准，点击货号直达对应产品页

七、规格选购建议

初试 / 摸条件

做 kill curve、筛一两块 6 孔板的细胞，100 mg 装足够。

S17023-100mg

常规筛选 / 建系

同时推进 2-5 株稳转细胞系，250 mg-1 g 装更从容。

S17023-250mg / 1g

大批量 / 长期维持

细胞库、CRO 长期维持与大规模筛选，建议 5 g / 25 g 装。

S17023-5g / 25g

八、常见问题 FAQ

1	G418 和 Geneticin 是同一个东西吗？

是。Geneticin 是 G418 的常用商品名，二者指同一物质。源叶在售的 G418 硫酸盐 S17023（CAS 108321-42-2）即 G418 的硫酸盐形式，英文名 G418 sulfate，级别 BR、效价 600 μg/mg。

2	为什么正式筛选前一定要做 kill curve？

不同细胞系对 G418 的敏感性可相差十倍以上（干细胞约 50-150 μg/mL，部分贴壁细胞需 400-800 μg/mL）。不做预实验会出现两种失败：浓度过高把阳性细胞一起杀光；浓度过低筛不干净、假阳性克隆大量生长。建议设置 0 / 50 / 100 / 200 / 400 / 600 / 800 / 1000 μg/mL 梯度，选择7 天内使细胞全部死亡的最低浓度作为筛选浓度。

3	G418 母液怎么配、怎么保存？

推荐用无菌去离子水配成 100 mg/mL 母液，0.22 μm 滤膜过滤除菌后分装，-20℃ 冻存、避免反复冻融；4℃ 可短期存放，建议 1 个月内用完。切勿用含血清培养基直接溶解干粉，也不要高温灭菌。

4	效价标注 600 μg/mg 是什么意思？称量时要换算吗？

意思是每毫克干粉中含约 600 μg 具有活性的 G418，这是氨基糖苷类抗生素的常规效价标注方式。按目标浓度配制培养基时应以标签标注效价为基准折算，否则实际活性浓度会低于计算值、导致筛选失败。

5	加压后多久能出克隆？一直没有克隆怎么办？

通常 7-14 天可见抗性克隆。若 10 天仍无克隆，按概率排查：① kill curve 浓度定得太严；② 转染/感染效率过低（可换用脂质体 2000 S30520 或 HP 核酸转染试剂 R43514）；③ G418 母液反复冻融或培养基存放过久失效；④ 接种密度过低。建议先用未转染细胞做阳性对照验证药物活性。

6	稳转株建成后还要继续加 G418 吗？

建议用维持浓度（约筛选浓度的 1/2）持续维持，防止无选择压力时外源片段随传代丢失、表达衰减；但正式做功能实验前建议撤药 1-2 代，避免药物本身干扰细胞状态与读值。

7	G418 能和嘌呤霉素、潮霉素 B 一起用吗？

可以，这是双抗/多抗共筛的常规做法，但每种抗生素都要单独做 kill curve，并验证联用时的正交性（联用浓度通常低于单用）。源叶可选配套：嘌呤霉素盐酸盐 V30200、嘌呤霉素二盐酸盐 V34573、潮霉素 B 溶液 V33764、硫酸博来霉素 S17100、灭瘟素 S 盐酸盐 V30030。

8	含 G418 的培养基能存放多久？

37℃ 培养条件下 G418 活性半衰期约 5 天，因此含药培养基建议现用现配，或2-3 天更换一次；母液则分装冻存、避免反复冻融。长时间不换液是「筛选后期克隆死亡 / 假阳性增多」的常见原因之一。

9	悬浮细胞和干细胞有什么特别注意事项？

悬浮细胞（如 Jurkat、K562）筛选时密度不能太低，建议维持 2-5×10⁵/mL，否则大量死亡会迅速耗尽营养；iPSC / 胚胎干细胞对 G418 极为敏感，应从 50 μg/mL 起做梯度，切勿直接套用 400-600 μg/mL 的贴壁细胞方案。

10	S17023 怎么储存和运输？长期筛选要不要查支原体？

干粉按官网标注2-8℃ 避光保存；溶解后的母液需 -20℃ 分装冻存。G418 筛选周期通常长达 2-3 周，属于支原体污染高发场景，建议在筛选启动前和建系后各检测一次，可选用支原体检测试剂盒（PCR 法）R43810 或支原体检测试剂盒（荧光法）R44046。

产品介绍

Product Overview

源叶G418 硫酸盐 · 现货速达