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青霉素酰化酶(Penicillin G acylase, PGA; EC 3.5.1.11) 又称为青霉素酰化酶、青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶，是一种作用于青霉素G侧链的水解酶。

青霉素G酰化酶作用于青霉素G、头孢菌素G和相关抗生素产生β-内酰胺抗生素中间体6-氨基青霉烷酸（6-amino penicillanic acid，6-APA）或7-氨基-3-去乙酰氧基头孢烷酸（7-amino des-acetoxy cephalosporanic acid，7-ADCA)）和副产品苯乙酸（phenyl acetic acid，PAA）。这些抗生素中间体是半合成青霉素类抗生素（氨苄青霉、阿莫西林、氯唑西林，舒巴坦等）和头孢菌素类抗生素（头孢羟氨苄、头孢氨苄等）的结构单元。

该酶是异源四聚体蛋白，包含来自于一条肽链前体的2个a小亚基和2个β大亚基。PGA是N端亲核水解酶超家族成员的一种，在或活性中心附近有一个共同的折叠结构，活性中心的N端位置带一个具有催化活性的丝氨酸，半胱氨酸或苏氨酸。

分子量：α-亚基    59kd；β-亚基   22.9kd

活力定义：一个酶活性单位定义为pH 8.0，28℃每分钟水解1μmol苄青霉素所需的酶量。