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产品介绍

Product Overview

日期:2026-08-20
PAGE 胶配制慢、味道大、点样难?问题通常出在哪一步

手工配制 SDS-PAGE 胶时常见的「慢、臭、难点样」问题源于哪些步骤,并给出预制胶等替代方案。

手工灌胶三连痛:聚合慢、丙烯酰胺味冲、梳子一拔样品漏。多数问题不是你手笨,而是几个关键试剂和手法在作怪。

什么是 PAGE 胶?

聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)由丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺交联聚合而成,孔径由总浓度(T)与交联度(C)决定,是蛋白按分子量分离的物理介质。

  「慢、臭、难点样」分别卡在哪

痛点 常见根因 对策
聚合慢 APS/TEMED 失效或比例错、温度低 换新引发剂、室温促聚
味道大 未聚合丙烯酰胺挥发、通风差 通风橱操作、用预制胶
点样难漏 梳齿未插稳、胶面不平 拔梳前确认聚合、平行插梳

APS(过硫酸铵)和 TEMED 是聚合的「开关」,过期或受潮就聚合无力;丙烯酰胺单体有神经毒性且味大,这正是预制胶受欢迎的原因。

  常见错误操作清单

# 步骤说明
1 确认 APS 现配且在有效期内,TEMED 密封避光
2 按比例混匀后快速灌胶,避免提前聚合
3 加异丙醇/水封层使胶面平整
4 拔梳前确认完全聚合,垂直匀速拔出
5 点样前用缓冲液洗孔,防止样品扩散

  常见误区

误区 正确认知
聚合慢就多加 TEMED 过量会致胶脆、孔径不均,先查 APS 效期
闻不到味就安全 丙烯酰胺低浓度也有害,始终通风防护
手工一定比预制好 预制胶重复性好、省时,常规实验更稳

  源叶能帮你准备什么

实验方向 源叶相关品类 用途提示
预制胶 不同浓度 SDS-PAGE 预制胶以及试剂盒 免配制、重复性好;性价比高,可选自配可选预制
配制试剂 丙烯酰胺、APS、TEMED、Tris 手工配制原料
其他试剂 各种缓冲液 适合多种分子量的蛋白跑胶

  常见问题 FAQ

Q:为什么聚合特别慢?
A:多因 APS 失效/受潮或 TEMED 不足、温度低,先换引发剂再调环境。

Q:味道大怎么防护?
A:在通风橱操作、戴手套口罩,或改用预制胶免去单体接触。

Q:点样孔总漏怎么破?
A:确认胶完全聚合后垂直拔梳,点样前用上槽缓冲液冲洗加样孔。

Q:预制胶和手工胶差别?
A:预制胶重复性好、省时、低毒暴露;手工胶灵活但波动大。

Q:APS 为什么要现配?
A:过硫酸铵水溶液易分解失活,现配或分装冻存才能保证引发效率。

Q:胶浓度怎么影响结果?
A:总浓度越高孔径越小,对小分子分辨好;交联度影响机械强度与筛分特性。

 
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